W jaki sposób stosuje się testy serologiczne do diagnozy?

Serologia (z łaciny: Serum - surowica), zwana nauką właściwości surowica krwi osoba Definicja reakcji serologicznych zostanie przedstawiona poniżej.

Jednym z głównych zadań dzisiejszej serologii jest opracowanie metod wytwarzania konkretnych surowic do diagnozy i leczenia, ocena stopnia ich aktywności i określenie mechanizmów narażenia ludzi. Serologiczne badanie krwi jest laboratoryjną metodą badawczą do oznaczania antygenów lub przeciwciał (specyficznych białek) pacjenta, które zawiera surowica krwi pacjenta. Badania serologiczne nie są uważane za w 100% specyficzne i czułe w diagnozowaniu chorób zakaźnych. Dlatego ocena wyników badań jest możliwa tylko przy uwzględnieniu obrazu klinicznego choroby jako całości. Eksperci preferują dokładniejszą diagnozę kilku testów.

Reakcje serologiczne - co to jest?

W diagnostyce laboratoryjnej większości chorób zakaźnych stosuje się metodę wykrywania przeciwciał wytwarzanych w krwi pacjenta w antygenach patogenu. Są stosowane w praktyce medycznej od początku XX wieku. Wraz z rozwojem nauki, współcześni lekarze nauczyli się identyfikować antygeny w strukturze drobnoustrojów, a także ujawnili wzór chemiczny ich toksyn. Umożliwiło to opracowanie SERA przeznaczonych nie tylko do leczenia, ale również do diagnozy chorób zakaźnych. Surowicę wytwarza się przez podawanie atenuowanych patogenów zwierzętom laboratoryjnym. Ustawienie reakcji serologicznych jest obecnie bardzo popularne.

Po standardowym czasie ekspozycji przygotowuje się preparaty z krwi zwierząt laboratoryjnych. Są stosowane w reakcjach serologicznych w celu identyfikacji drobnoustrojów lub ich toksyn. Metoda opiera się na odpowiedzi immunologicznej organizmu człowieka. Badanie to stosuje się w diagnostyce chorób zakaźnych w celu identyfikacji obecności lub braku przeciwciał u pacjenta przeciwko jakimkolwiek wirusom lub bakteriom, a także w celu określenia grupy krwi. Zewnętrzne objawy reakcji serologicznych zależą od warunków postępowania i stanu, w jakim antygeny znajdują się w krwi pacjenta. Jeśli drobnoustroje nie rozpuszczą się, będą się wytrącać, lizować, wiązać lub unieruchamiać w surowicy. Jeśli nastąpi rozpuszczenie antygenów, wówczas wykrywane jest zjawisko neutralizacji lub strącania. Reakcje serologiczne były stosowane przez długi czas.

Materiał do nauki

Podczas przeprowadzania badań serologicznych z wykorzystaniem cząstek materiału biologicznego pobranych od pacjenta: krwi, śliny, kału. W wielu przypadkach badany jest materiał zebrany w niektórych obiektach środowiskowych: woda, ziemia.

Jak dokładnie przebiegają reakcje serologiczne w mikrobiologii?

Metoda pobierania materiału biologicznego

Dzięki tej analizie nie jest konieczne dokładne przygotowanie pacjenta. Pobieranie krwi odbywa się rano przed posiłkami w gabinecie lekarskim przy użyciu standardowych metod hematologicznych. Do tej analizy pobiera się próbki krwi za pomocą dwóch metod: krew żylną pobiera się z żyły łokciowej, a krew kapilarną pobiera się z palca. Materiał do analizy znajduje się w jałowych, szczelnie zamkniętych probówkach.

Co jest potrzebne do ustawienia reakcji serologicznych?

Cechy transportu i przechowywania materiału biologicznego

Natychmiast po pobraniu krwi jest transportowany do specjalnego laboratorium, w którym surowica jest przygotowywana tego samego dnia. Możesz przechowywać go nie dłużej niż cztery lub sześć dni w lodówce w temperaturze od 2 do 4 stopni. Jeśli chcesz zachować surowicę przez dłuższy czas, jest ona zamrożona. Aby nie naruszyć jakości materiału biologicznego, zamrażanie i rozmrażanie można wykonać tylko raz. Długotrwałe przechowywanie powoduje, że przeciwciała stają się nieaktywne i tracą niektóre z ich właściwości. Immunoglobuliny klasy M są uważane za najbardziej wrażliwe na niższe temperatury przechowywania.

Po rozmrożeniu serwatki jest ona dobrze wymieszana w celu uzyskania jednorodnej kompozycji. Pomaga przywrócić stężenie przeciwciał zawartych w tym materiale.

Badania serologiczne - do czego służy?

Metodę reakcji serologicznych stosuje się do diagnozowania bąblowicy, włośnicy, toksokarozy, przywrady, wągrzycy, toksoplazmozy, amebiazy, giardiozy. Jest to wymagane w celu określenia skuteczności zaleconego przebiegu leczenia, a także w celu wykrycia nawrotu choroby, która nastąpiła po wyleczeniu pacjenta. Gdzie jest najpowszechniejsze zastosowanie reakcji serologicznych?

Podstawowe metody diagnostyczne

Mikrobiolodzy i immunolodzy w większości przypadków stosują reakcję aglutynacji, wytrącania, neutralizacji, reakcji z udziałem dopełniacza, przy użyciu wyznakowanych przeciwciał i antygenów (metody radioimmunologiczne, immunofermentalne, immunofluorescencyjne).

Reakcja aglutynacji (RA)

Serologiczny test aglutynacji jest przeprowadzany dość prosto i jednocześnie bardzo wyraźnie. Pozwala to na szybkie ustalenie, czy antygeny zawierają surowicę od pacjenta. Reakcja służy do diagnozy dur brzuszny paratyfus i tyfus. Opiera się na specyficznym oddziaływaniu między ludzkimi przeciwciałami (aglutyniny) i drobnoustrojami (agglutenogeny). W procesie ich oddziaływania wytrąca się tworzenie cząstek. To jest pozytywny znak. Do reakcji można wykorzystać żywe lub zabite czynniki mikrobiologiczne, grzyby, pierwotniaki, krwinki i komórki somatyczne. Badanie chemiczne przeprowadza się z podziałem na dwa etapy: w pierwszym etapie przeciwciała miesza się z antygenami, a następnie wytrąca się (powstaje aglutynat) podczas reakcji.

Serologiczna metoda diagnostyczna może być inna.

Reakcja aglutynacji pośredniej (RPGA)

Ta reakcja jest uważana za bardziej wrażliwą niż poprzednia. Służy do diagnozowania chorób powodowanych przez różne bakterie, pasożyty wewnątrzkomórkowe, pierwotniaki. Ta analiza może wykryć stężenie przeciwciał, nawet w bardzo małych ilościach. Do jego wdrożenia konieczne jest użycie oczyszczonych krwinek czerwonych owiec i ludzkich czerwonych krwinek, wstępnie traktowanych przeciwciałami lub antygenami (w zależności od tego, co chcą znaleźć w laboratorium). W niektórych przypadkach przy użyciu czerwonych krwinek immunoglobulin ludzkich. Reakcję serologiczną krwinek czerwonych uważa się za utrzymywaną, jeżeli czerwone krwinki wytrącają się na dnie probówki. Kiedy komórki znajdują się w formie odwróconej kopuły i zajmują całe dno rury, oznacza to reakcję dodatnią. Negatywna reakcja jest rozważana, jeśli czerwone krwinki są osadzone w formie kolumny lub przycisku na środku dna.

Wykonuje się testy serologiczne na kiłę.

Strącanie reakcji (RP)

W celu identyfikacji bardzo małych cząstek antygenów stosuje się reakcję strącania. Może to być białko (lub jego część), związki białek, lipidów lub węglowodanów, częściowo reprezentowane bakterie i ich toksyny. Surowicę do analizy wykorzystującej tę reakcję uzyskuje się przez zakażenie zwierząt laboratoryjnych, zazwyczaj królików. Metodę tę stosuje się w celu uzyskania prawie każdej wytrąconej surowicy.

Mechanizm serologicznej reakcji strącania jest podobny do reakcji aglutynacji. Przeciwciała zawarte w surowicy są zmieszane z antygenami w roztwór koloidalny łączenie z dużymi cząsteczkami białka. Cząsteczki te osadzają się na dnie probówki lub na podłożu żelowym. Ta wersja badania jest uważana za bardzo dokładną, a przy jej pomocy można wykryć nawet nieznaczne dawki substancji. Reakcja strącania, która jest również szeroko stosowana w medycynie sądowej, umożliwia diagnozowanie dżumy, tularemii, wąglika, zapalenia opon mózgowych.

Reakcje tego typu przeprowadza się nie tylko w ciekłym ośrodku, ale w tym celu stosuje się żel agarowy. Ta procedura nazywana jest metodą rozproszenia dyfuzyjnego. Daje możliwość badania złożonych mieszanin antygenowych. W żelu przeciwciała i antygeny przesuwają się ku sobie z różnymi prędkościami, a po spotkaniu tworzą linie opadów, wzdłuż których dochodzi się do wniosku.

Co jeszcze jest znaną metodą reakcji serologicznej?

Reakcja zobojętniania (PH)

Anty-toksyczne surowice neutralizują działanie egzotoksyn wytwarzanych przez mikroorganizmy. Odpowiedź serologiczna tego typu opiera się na tej interakcji. W mikrobiologii ta metoda jest stosowana do miareczkowania surowic, toksyn i toksoidów, a także do określania ich aktywności terapeutycznej. Ponadto, korzystając z tej reakcji, można określić tożsamość egzotoksyny do określonego typu lub typu. Tężec, błonica i zatrucie jadem kiełbasianym są diagnozowane w ten sposób. Badanie prowadzi się zarówno na tabletce, jak i na podłożu żelowym.

Ponadto w innych testach stosuje się reakcje serologiczne.

Reakcja lizy (RL)

Surowica, która wchodzi w ciało pacjenta, jest wyposażona, oprócz głównego zadania funkcjonalnego, w zapewnienie odporności biernej, właściwości rozpuszczania. Przyczynia się do rozpuszczania drobnoustrojów, obcych elementów komórkowych i wirusów dostających się do organizmu pacjenta. W zależności od składu przeciwciał, surowica jest podzielona na bakteriolizę, cytolizyny, spiroetolizyny, hemolizyny i inne. Te przeciwciała są nazywane komplementami. Przeciwciała zawierają prawie wszystkie płyny ludzkiego ciała, mają złożoną strukturę białkową i są bardzo wrażliwe na podwyższoną temperaturę, drgania, wystawienie na działanie kwasu i bezpośrednie światło słoneczne. Ale w stanie suchym są w stanie zachować swoje właściwości lizujące przez okres do 6 miesięcy.

Następujące reakcje serologiczne tego rodzaju krwi są przeprowadzane: bakterioliza, hemoliza.

Reakcja bakteriolizy jest przeprowadzana przy użyciu surowicy pacjenta i specyficznej surowicy odpornościowej z aktywnymi drobnoustrojami. Jeśli we krwi jest wystarczająco dużo komplementu, technik laboratoryjny będzie świadkiem lizy bakterii, a reakcja będzie uważana za pozytywną. Drugim rodzajem reakcji serologicznej tego typu jest to, że erytrocyty pacjenta są przetwarzane przy użyciu surowicy, która zawiera hemolizyny, które są aktywowane tylko wtedy, gdy istnieje jakikolwiek komplement. Jeśli jest obecny, naukowiec będzie obserwować rozpuszczanie czerwonych krwinek. Metodę tę stosuje się przy przeprowadzaniu reakcji Wassermana (kiły).

Reakcja wiązania komplementu (RSK)

Badanie to służy do wykrywania przeciwciał we krwi pacjenta i do identyfikacji patogenów poprzez ich strukturę antygenową. Wszystkie poprzednie opisane reakcje są uważane za proste. CSC jest złożoną reakcją, ponieważ obejmuje nie dwa, ale trzy składniki: przeciwciało, antygen i komplement. Istota tego polega na oddziaływaniu między przeciwciałem a antygenem, który występuje tylko w obecności białek dopełniacza, zaadsorbowanych na wierzchu utworzonego kompleksu AG-AT. Antygeny po dodaniu komplementu znacznie się zmieniają, to właśnie te transformacje pokazują jakość reakcji. Może to być liza, hemoliza, unieruchomienie, działanie bakteriobójcze lub bakteriostatyczne.

Powyższe reakcje różnią się od siebie techniką produkcji, ale wszystkie z nich mają zasadniczo reakcję interakcji antygen-przeciwciało i są używane do ich identyfikacji. Istnieje kilka rodzajów reakcji serologicznych o podobnej zasadzie działania.