Analiza ELISA: transkrypt

Test immunologiczny enzymatyczny (ELISA) to metoda badania krwi w laboratorium, oparta na poszukiwaniu specjalnych komórek - przeciwciał przeciwko różnym chorobom. Metoda pozwala nie tylko zidentyfikować patogen, ale także ustalić, na jakim etapie jest proces patologiczny. Ta ostatnia jest bardzo ważna dla prognozy i dalszego leczenia pacjenta.

Zalety i wady metody

Spośród wszystkich nowoczesnych metod diagnostycznych, ELISA jest najbardziej innowacyjna i technicznie dokładna. Jego główne zalety to:

1. Możliwość wyszukiwania wszystkich istniejących przeciwciał przeciwko chorobom zakaźnym we krwi pacjenta.
2. Wysoka dostępność metody badawczej. Do tej pory każde laboratorium w średniej skali może wykonywać analizy ELISA.
3. Niemal 100% specyficzności i czułości metody.
4. Umiejętność poszukiwania przeciwciał i antygenów, a także ustalania stadium procesu patologicznego i śledzenia jego dynamiki, ze względu na porównanie liczby.

Taka przewaga nad innymi testami całkowicie przesłania pojedynczą wadę analizy: jest w stanie wykryć przeciwciała, ale nie sam patogen.

Kluczowe terminy oceny analizy

Aby zrozumieć, co dzieje się z analizą ELISA, co to jest i jak jest wykonywana, musisz zapoznać się z podstawowymi pojęciami używanymi przez specjalistów.

1. Przeciwciało to białko wytwarzane przez komórki. układ odpornościowy ludzkie (limfocyty typu B). Reagują specyficzną reakcją na spożycie obcego czynnika lub substancji. Inną nazwą przeciwciał są immunoglobuliny, które należą do różnych klas: A, E, M, G. Różnią się między sobą masą, szybkością reakcji, okresem półtrwania i szeregiem innych cech. Zwykle krew ludzka zawiera głównie immunoglobuliny klasy G. Jeśli dojdzie do jakiejkolwiek infekcji, liczba immunoglobulin A i M gwałtownie wzrasta. Immunoglobuliny E brać udział w reakcjach alergicznych.
2. Antygen jest obcym czynnikiem pochodzenia organicznego i wysokiej masy cząsteczkowej. Najczęściej reprezentuje patogeny lub ich biologicznie aktywne substancje.
3. Kompleks antygen-przeciwciało, czyli kompleks immunologiczny, jest bezpośrednim połączeniem obcej substancji i immunoglobuliny, co prowadzi do odpowiedzi immunologicznej.

Istota i zakres metody

Pacjenci często mają pytania: ELISA, co to jest, w jaki sposób jest wykonywana i do czego służy? Możesz powiedzieć o metodzie, opisując w skrócie jej etapy.

Etap przygotowawczy . Lekarz laboratoryjny używa specjalnej tabletki, w której znajduje się 96 otworów. Antygen określonego patogenu zastosowano na powierzchnię każdej studzienki.

Etap 1. Wykonuje się pobieranie krwi, które następnie nakłada się kroplami do dołka. W dołku inicjowana jest reakcja między antygenem a przeciwciałem we krwi.

Etap 2. W studni trwa reakcja z tworzeniem się kompleksów immunologicznych. Rezultatem jest substancja o określonym kolorze. Intensywność barwienia zależy od ilości przeciwciał w krwi pacjenta dla każdego konkretnego patogenu.

Etap 3. Ocena wyniku za pomocą fotometrii. Aby to zrobić, użyj specjalnego urządzenia zwanego "spektrofotometrem". Stosuje się go do porównania gęstości materiału w dołku i próbki kontrolnej. Następnie urządzenie generuje wynik za pomocą analizy matematycznej.

Ocena wyników i celu testu ELISA

Interpretacja wyniku zależy od kilku ważnych niuansów:

1. Studnie gęstości optycznej.
2. Producent płyt z otworami (systemy testowe).
3. Laboratorium, w którym przeprowadzono badanie.

Biorąc pod uwagę te niuanse, nigdy nie należy porównywać dwóch wyników z różnych systemów testowych lub z różnych laboratoriów.

Innym ważnym punktem wpływającym na analizę testu ELISA jest tak zwana awidność przeciwciał. Ten parametr charakteryzuje ilość antygenu, siłę wiązania w kompleksie "antygen-przeciwciało". Podstawą jego definicji jest przetwarzanie kompleksu immunologicznego mocznika w celu usunięcia struktur białkowych. Pozwala to zniszczyć słabe ogniwa między antygenem a przeciwciałem i pozostawia tylko silne. Wartość badań nad zachłannością polega na tym, że można go wykorzystać do określenia czasu trwania infekcji. Ta informacja jest niezwykle ważna dla postawienia diagnozy kobietom w ciąży.

Badanie krwi metodą ELISA to:

1. Aby wyszukać różne antygeny patogenów.
2. Do badania poziomów hormonalnych.
3. Do badania na obecność autoimmunologicznej patologii.
4. Aby wykryć markery raka.

Odmiany testu ELISA

Analiza ELISA ma następujące odmiany:

1. Pośrednie.
2. Bezpośredni.
3. Konkurencyjny.
4. Metoda blokowania

W rzeczywistości, dzisiaj stosuje się tylko metodę zwaną ELISA (test immunoenzymatyczny). Oparty jest on na opisanej wyżej reakcji tworzenia kompleksu antygenu z przeciwciałem ze zmianą barwy na powierzchni studzienki.

Na szczególną uwagę zasługuje ilościowy test krwi ELISA. Nie jest to rodzaj analizy, ale sposób oceny wyników. Dzięki niemu policzono liczbę przeciwciał i określono ich klasy. Wynik zależy od gęstości optycznej próbki, systemu testowego, na którym przeprowadzono test ELISA, a także od laboratorium.

Choroby wykrywane przez ELISA

ELISA to badanie krwi, które pozwala zidentyfikować ogromną liczbę różnych chorób zakaźnych. Co więcej, z taką samą dokładnością wykrywa się zarówno choroby wirusowe, jak i bakteryjne. Na przykład, stosując tworzenie kompleksów immunologicznych, można udowodnić obecność antygenów czynników wywołujących następujące choroby:

1. Wirusowe zapalenie wątroby A, B i C.
2. Zakażenie HIV i AIDS.
3. Wirus Epstein-Barr.
4. Wirus opryszczki wszelkiego rodzaju.
5. Wirus cytomegalii.
6. Corey
7. Toksoplazmoza.
8. Kiła i wiele chorób przenoszonych drogą płciową (STD).
9. Pasożytowanie i inne choroby.

Ponadto test ELISA może wykryć:

1. Markery nowotworowe - TNF (czynnik martwicy nowotworów), PSA (antygen swoisty dla gruczołu krokowego), CEA (antygen nowotworowo-zarodkowy), CA-125 (marker nowotworu jajnika)
2. Hormon ciążowy - hCG (gonadotropina kosmówkowa).
3. Zaburzenia układu rozrodczego: hormony żeńskiego i męskiego układu rozrodczego.
4. Patologia tarczycy.

Ważne jest, aby wspomnieć, że test ELISA na HIV jest dziś głównym sposobem diagnozowania tej niebezpiecznej choroby.

Materiał do testu ELISA i technologii ogrodzeniowej

Aby wykonać test ELISA u pacjenta, krew pobiera się na pusty żołądek. Ponadto, surowica jest uzyskiwana z krwi, która jest bezpośrednio wykorzystywana do analizy. Ponadto, ELISA może być wykonywana na płynie mózgowo-rdzeniowym (CSF), śluz szyjkowy kanał (szyjka macicy), płyn owodniowy, a nawet płyn szklisty (gałka oczna).

Przed podaniem krwi pacjentowi ostrzega się, że nie powinien przyjmować żadnych leków i zaleca się zakończyć leczenie antybiotykami i lekami przeciwwirusowymi co najmniej dwa tygodnie przed pobraniem krwi.

Termin odbioru i interpretacja wyników

Czas otrzymania odpowiedzi od laboratorium nie zależy od szybkości jego pracy, ale od tego, na jakim etapie jest choroba i jakie przeciwciała już pojawiły się we krwi. Na przykład: immunoglobuliny M pojawiają się około 2 tygodnie po pobraniu krwi do analizy i oznaczają, że proces znajduje się na etapie pierwotnej infekcji lub nastąpiło zaostrzenie przewlekłego. Jednocześnie przeciwciała klasy M i G pojawiają się podczas pierwotnej infekcji. Co więcej, te ostatnie można wykryć po 4 tygodniach.

IgA pojawia się po 2-3 tygodniach sam lub z M, co oznacza ostrą infekcję, lub z G, co wskazuje na przewlekły proces.

Takie różne okresy pojawiania się przeciwciał we krwi spowodują, że pacjent długo będzie czekał na wynik. Dopuszczalne jest czekanie ponad miesiąc po wykonaniu testu ELISA. Dekodowanie i interpretacja przez lekarza również zajmuje pewien czas.