Środa Endo. Skład i przygotowanie pożywki

Każdy miłośnik mikrobiologii wie, że hodowla jakiejkolwiek kolonii wymaga odpowiedniej pożywki. Jednocześnie każda pożywka ma swoją własną charakterystykę, zarówno podczas przygotowywania, jak i użytkowania. Jeśli zdecydujesz się wyhodować kolonię enterobakterii, będziesz potrzebować środowiska Endo. O tym właśnie jest ten artykuł.

Co to za pożywka?

Środowisko Endo służy do usuwania enterobakterii i ma zróżnicowany charakter diagnostyczny. Dlaczego tak się nazywa? To bardzo proste - pochodzi od jego odkrywcy - Shigeru Endo. To znany mikrobiolog pochodzenia japońskiego.

Jaka jest specyfika tego środowiska?

Nie jest tajemnicą, że w mikrobiologii istnieje pojęcie bakterii Gram-dodatnich i Gram-ujemnych. Tak więc, jeśli zdecydujesz się wyhodować kolonię bakterii Gram-ujemnych, do tego potrzebujesz środowiska, które będzie hamować wzrost bakterii Gram-dodatnich. Ta funkcja może być łatwo obsługiwana przez środowisko Endo. Ze względu na swoje selektywne właściwości zapobiega rozwojowi kolonii Gram-dodatnich.

Średni skład

Charakterystyka każdego środowiska zależy przede wszystkim od składników. Skład środowiska Endo obejmuje:

• siarczan sodu;
• fosforan sodu;
• agar z peptonem mięsnym;
• magenta;
• węglan sodu;
• laktoza.

Ze względu na niski koszt przygotowania, środowisko Endo jest bardzo popularne wśród mikrobiologów-amatorów.

Jaka jest zasada środowiska?

Siarczek sodu i fuksyna obecne w jej składzie przyczyniają się do powstawania odczynnika Schiffa. Oznacza to, że siarczek sodu spowoduje odbarwienie fuksyny. W wyniku tej reakcji powstaje kwas fuksiurowy.

Wszyscy wiedzą, że kolonie enterobakterii mogą fermentować laktozę, podczas tej reakcji powstaje kwas mrówkowy. Z przebiegu chemii wiadomo, że kwas mrówkowy oddziałuje z aldehydami i daje reakcję jakościową. Z tego powodu kolonia enterobakterii zostanie pomalowana na kolor różowo-szkarłatny. Inne bakterie Gram-dodatnie (z wyjątkiem pałeczek jelitowych) nie mogą łączyć w sobie laktozy, więc nie będą wybarwione.

W rezultacie jedynie pałeczki jelitowe w postaci szkarłatnych sztyftów wyróżniają się na szalce Petriego podłożem Endo, które ma różowawy kolor. Wszystkie pozostałe kolonie zostaną zniszczone lub nie wyróżnią się na tle podłoża.

Gotowanie Substrat odżywczy

W mikrobiologii środowisko Endo jest jednym z najważniejszych pożywek. Aby przygotować sobie takie podłoże, wystarczy postępować zgodnie z poniższymi instrukcjami.

1. Bulion do gotowania. Jakikolwiek mięso lub kość z resztkami mięsa zrobi, musisz usunąć tłuszcz i ścięgna tak bardzo, jak to możliwe. Gotuj mięso przez około 20-25 minut w temperaturze 100 stopni. Po ostudzeniu bulionu, aby zamrozić krople tłuszczu.

2. Przefiltruj powstały bulion przez gęsty bawełniany filtr do absolutnej przezroczystości. Należy zauważyć, że filtrowanie przez gazę jest niepożądane, ponieważ istnieje ryzyko uderzenia małych kawałków mięsa.

3. Odważ pozostałe składniki. Musimy stworzyć suche środowisko i przygotować odczynnik Schiffa. W tym celu należy zważyć:

• pepton 1,3 g;
• laktoza 1 g;
• agar 2 g;
• Fuchsin 0,2 g

4. Dodaj fuksynę do 30 ml wody, wymieszaj fuksynę z wodą. Następnie dodaj stężony roztwór siarczynu sodu, aż kolor fuksyna zniknie.

5. Wytrącony osad wytrąca się z kwasu fuksikowego, usuwając osad przez filtrację.

6. Dodaj gorące medium do gorącego bulionu.

7. Poczekaj na rozpuszczenie i dodaj odczynnik Schiffa.

8. Powstały substrat sterylizuje się przez około 30 minut w temperaturze około 125 stopni.

Wyniki uprawy muszą trwać około 5 dni, ale im dłużej je trzymasz, tym wyraźniejsze będą kolonie bakterii.